迷迭香提取物的防腐及化妆品功效评价

1.5.3常用抗氧化剂
目前抗氧化剂有诸多种类，但在总体上抗氧化剂可以分为化学合成抗氧化剂和天然抗氧化剂。这两种类型的抗氧化剂各自有各自的优势，同时又分别有各自的不足之处。
1.5.3.1人工合成抗氧化剂
人工合成抗氧化剂是通过化学合成的方法得到的。虽然，人工合成抗氧化剂的安全性一直都是比较敏感的话题，但是由于其具有生产成本低，抗氧化效果好，使用、贮藏方便等显著特点，因此人工合成抗氧化剂的生产与应用仍受到重视和关注。
人工合成的抗氧化剂目前已经有很多种类，其中我国允许使用的合成抗氧化剂包括二丁基羟基甲苯(BHT)，丁基羟基茴香醚(BHA)，没食子酸丙酯(PG)，叔丁基对苯二酚(TBHQ)，硫代二丙酸，硫代二丙酸二月桂酯(DLTP)，4-己基间苯二酚(4-HR)和乙氧基喹啉等。
1.5.3.2天然抗氧化剂
天然抗氧化剂可以来源于生物体，包括动物、植物、微生物等。追求健康、崇尚天然食品已成为现代生活的一种潮流，人们对使用人工合成抗氧化剂越来越感到不安。近年来，人们对合成抗氧化剂的安全性问题进行了广泛的研究，动物试验结果证明，将BHT及其代谢产物BHT-OOH、BHT-OH、DBQ和BHT-SCH3注射到雄性幼鼠腹膜内，会使鼠肺细胞增生、肺组织增重。据悉，目前，部分发达国家已限量或禁止使用对人体有毒副作用的化学合成抗氧化剂，如北欧已禁止使用BHA、BHT，美国、日本及西欧国家也已限量使用。
目前国际普遍采用的天然抗氧化剂有茶多酚、异维生素C钠盐、维生素C、维生素E等以及它们的混合物[22]。
1.5.4抗氧化剂抗氧化能力的检测方法
经过多年的对于抗氧化剂的研究，己经建立了一套筛选和研究抗氧化剂的方法和模型，以期能够模仿生物体的实际情况，评估抗氧化剂在生物体内发挥抗氧化性的能力。
目前，主要从以下几个方面开展：体外实验体系，包括溶液体系清除自由基能力的检测[23]，抗脂质体过氧化检测，抗自由基对蛋白质和核酸损伤能力的检测，以及细胞或组织体系中清除自由基能力的检测等等;体内实验体系一般是通过建立某种实验动物模型来检测与抗氧化清除自由基有关的生理功能，例如降血脂、降低动脉硬化几率、抗衰老、抗癌以及与心肌再灌注缺血或其他疾病等等，当然有的最终还需要人体试食或试用实验。其中，检测清除自由基能力采用的溶液体系主要有利用Fenton反应产生经自由基的体系，光照核黄素/EDTA体系或利用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产生超氧阴离子自由基的体系等等。检测清除自由基能力的细胞体系有利用促癌剂PMA刺激多形核白细胞呼吸爆发的体系，组织体系有利用缺血再灌注损伤心肌的体系等。具体的检测方法则有直接检测自由基的电子自旋共振(ESR)捕集技术，以及通过检测氧化产物的化学发光法和比色法等[24]。
不同抗氧化剂的抗氧化能力依赖于自由基的种类、产生过程、产生部位及它所作用的靶。故通过抗氧化试验确定抗氧化剂的抗氧化能力，应考虑采取多种自由基，作用于多系统、多方面来进行。
1.6迷迭香提取物美白功效评价
1.6.1皮肤黑色素的成因与美白机理
造成皮肤黑色素生成的原因有多种，如遗传因素和环境因素，并且其生成原因相当复杂。目前研究结果基本上认为其成因在于：皮肤细胞中的酪氨酸在酪氨酸酶的作用下，受环境中各种因素的影响，逐渐氧化为Dopa、Dopaquinone，Dopaquinone再经过一系列的代谢反应，聚合为Indole-5,6-quinone最后逐步转化为皮肤黑色素[25]。其反应方程式为：
 
皮肤黑色素细胞组织将黑色素转移到表皮基底层细胞中，随着细胞的新陈代谢而被带到角质层中，最后随角度化细胞脱落。若皮肤黑色素过速增长和分布不均时，就会造成局部皮肤过黑及色素沉着，出现皮肤黑色素。
因此，皮肤美白剂就是通过作用于皮肤黑色素生成，代谢的过程中，抑制黑色素生成且符合安全规范的物质。由于酪氨酸酶分别作用于酪氨酸转化为Dopa、Dopaquinone两个过程，目前的皮肤美白剂就是通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径，从而减少黑色素的生成达到美白皮肤的效果。
1.6.2常用美白剂
传统的皮肤美白剂，往往采用化学性物质，如过氧化氢、氯化氨基汞以及各种酚类衍生物。这些化合物能使黑色素组织迅速瓦解，达到快速美白之功效。但因其对皮肤腐蚀性、细胞毒性和过敏性等因素，具有极大的危险性，在许多国家的卫生规范中，已被禁用。目前要求的皮肤美白剂，不但美白效果有效且无副作用，一般源自天然植物提取物，如熊果苷[26]、曲酸及其衍生物、甘草黄酮、Biowhite 以及中草药提取物[27]等。这些皮肤美白剂对酪氨酸酶活性的抑制率大小成为衡量这类物质美白效果的重要依据。
1.6.3美白功效检测方法
1.6.3.1体外评价法
（1）酪氨酸酶活性抑制试验[28]。
（2）抑制黑色素合成实验：体外细胞培养法。在人体黑色素细胞或鼠B-16黑色素瘤细胞培养基中加入美白剂，与不加美白剂对比其抑制细胞生成作用。
（3）组织培养。
1.6.3.2体内评价法
（1）动物体内试验
（2）人体试验：①人体防止紫外线色素沉着改善实验  ②测定皮肤黑色素和血红色素含量  ③Lab色素系统测试
1.7迷迭香提取物保湿功效评价
1.7.1皮肤保湿机理
皮肤角质层的水分，对维持皮肤健康，防御外界刺激，防止皮肤老化以及滋润、美容皮肤都具有重要意义。角质层屏障功能紊乱是所有干燥皮肤疾病的主要原因，水是角质层形成所不可缺少的。角质层中水分常常以结合水的方式与角质层结合。要使皮肤光滑、柔软、富有弹性，处于良好状态，必须保持角质层的含水量处于最佳范围值。一般认为，其含水量应在10%-20%之间。低于10%，皮肤就会干燥、粗糙，甚至皲裂。
皮肤的干裂不仅仅是由于皮肤表面缺乏脂类性物质，更重要的原因是皮肤角质层中水分不足。现在实验上已证明，仅在干燥皮肤表面上涂抹只含有油脂的化妆品，并不能使其变得柔软。因此，要使皮肤处于润湿、柔软、富有弹性和光泽的状态，除了要具备有滋润作用的油脂性物质外，还要保持皮肤角质层中含有一定量的水分。这样，皮肤才是真正得到了保湿[29]。
1.7.2常用保湿剂
老一代保湿剂原料有：甘油(glycerinum)、1,2-丙二醇(glycol propylene)、1,3-丁二醇(butylenes glycol)、山梨醇(sorbitol)、吡咯烷酮羧酸钠(prrolidone carbonylic acid-Na) 、聚乙二醇(polyethylene glycol)、乳酸钠(netrium lactate)。
新一代保湿剂原料有：
透明质酸( hyaluronic acid , HA)HA维持真皮结缔组织中的水分，使结缔组织处于疏松状态，防止胶原蛋白由溶解状态变为不溶解状态，从而使皮肤饱满光滑、柔软细嫩。HA还具有吸流性润肤剂的功能，赋予皮肤润滑的感觉。HA可根据环境变化自动调节发挥最佳保水量的功能，从而角质层的含水量保持在最佳生理状态，令皮肤感觉自然舒适。
神经酰胺（ceramides）神经酰胺占细胞间质含量大而且含有大量的长链脂肪酸特别是亚油酸，可以很快地维持障壁结构的完整性。神经酰胺优越的保湿性还表现在它的生物调节作用：低温时吸潮，而高温时吸湿性自然下降，从而使皮肤组织的湿度保持在最佳状态。
几丁质和几丁聚糖(chitin and chitisan)几丁质和几丁聚糖是从甲壳纲动物(蟹、虾)和昆虫的硬壳中提取出来的甲壳质。具有良好的吸水性，是化妆品的天然添加剂[30]。
1.7.3保湿功效检测方法
为正确地了解化妆品的保湿功能，化妆品科学家和皮肤科医师通过长期的研究找到了许多皮肤保湿功能的评价方法，其中有体外法，人体主观评判法，也有借助各种仪器的非损伤性人体测量法，包括电子的、微波的、机械的、热力学的、扫描电镜和光谱学等。国内学者对皮肤保湿性能的研究多为体外法，近年来只有少数学者进行人体实验评价保湿功效。
测定角质层的水分含量的方法[31-32]：
①电容量测定法; 它的原理是基于水和其他物质的介电常数变化相当大，按照含水量的不同，适当形状的测量用电容器会随着皮肤电容量的变化而变化，而皮肤的电容量又是在测量的范围内，这样就可以测量出皮肤的水分含量。其结果通过设定的湿度测量值（Moisture Measurement Value,MMV）来表示。MMV为0～150的数值。电容量的测量方法比其它方法更优越，由于被测试皮肤和测试探头没有不自然的接触，几乎没有电流通过被测试皮肤，因此测试结果实际上不受极化效应和离子导电率的影响。仪器探头和皮肤中水分建立平衡过程中没有惯性，可以实现快速测量，这样同时也消除了活性皮肤对测量结果的影响。常用的仪器是Courage Khazaha公司生产的Corneometer CM 820
②经表皮失水率测定法：称为TEWL(Transepiidermal Water Loss),测试原理是根据漫射原理来测定临近皮肤表面水分蒸汽压变化，来反映经皮失水率。因此，TEWL反映角质层的屏障功能并不表示角质层汗水量。皮肤的TEWL值越低，说明皮肤屏障功能越好，反之越差。经表皮水分散失值TEWL对评估皮肤水分保护层的功能是非常重要的参数，在国际上已经得到了广泛的认可。目前测定的仪器主要是Courage-Khazaha生产的TEWAMETER210。